Magazyn nasienia
Ta metoda przechowywania nasienia (ejakulatu), jako krioprezerwacji, stała się dość rozpowszechniona w kriomedycynie. Obejmuje dodawanie specjalnego medium do płynu nasiennego i jego dalsze zamrażanie za pomocą oparów ciekłego azotu. Rozważ bardziej szczegółowo tę metodę zachowania męskich komórek płciowych i powiedz, jakie plemniki są odpowiednie do rozcieńczenia i dalszego przechowywania.
Podczas naturalnego zapłodnienia sekret męskich gruczołów płciowych miesza się częściowo z komórkami naskórka, w wyniku czego następuje pewna zmiana w pH środowiska, co prowadzi do zniszczenia osłonki lipoproteinowej plemników, tj. do ich aktywacja. Będąc w takim stanie, żywotność komórek rozrodczych jest ostro ograniczona, co wyklucza ich dalsze wykorzystanie do zapłodnienia in vitro. Dlatego używają tej metody kriokonserwacja.
Technika ta znacznie wydłuża okres przydatności nasienia i umożliwia:
- zmniejszyć ruchliwość plemników;
- zapewnia im dodatkowe źródło energii;
- chroni membrany komórek płciowych przed zniszczeniem;
- zapobiega gromadzeniu się toksycznych produktów przemiany materii;
- blokuje rozmnażanie się mikroorganizmów w ejakulacie.
Jakie media są używane do przechowywania nasienia?
W celu ułatwienia tak zwanego procesu miażdżenia ejakulatu, niezbędnego do wyizolowania z niego komórek zarodkowych, przeprowadza się wstępne rozcieńczenie nasienia. Stosuje się specjalne odczynniki.
Dzisiaj zwykle używa się syntetycznych mediów do przechowywania nasienia, z których każda wymaga specjalnych warunków. Z reguły tego rodzaju środowisko składa się z kilku komponentów, zwykle co najmniej trzech z nich. Tak więc, w ich składzie można wyróżnić cukry, najczęściej używane glukozy i laktozy, cytrynian sodu.
Jeśli mówimy o specyficznych związkach chemicznych, które można wykorzystać jako środki do przechowywania plemników, wówczas można je nazwać buforem Tris, Trilonem B, EDTA, Spermosanem PPK.
W jakich warunkach przechowywany jest ejakulat?Technologia zamrażania i przechowywania nasienia wymaga przestrzegania specjalnego trybu chłodzenia, a także stosowania specjalnych urządzeń. W tym przypadku sama sala laboratoryjna musi być koniecznie wyposażona w urządzenia do sterylizacji powietrza.
Przed pobraniem ejakulatu wszystkie niezbędne urządzenia do krioprezerwacji, w szczególności różne kolby, cylindry miarowe, pipety, filtry papierowe są sterylizowane w specjalnej szafce w temperaturze 130-150 stopni. Przed bezpośrednią procedurą ogrodzenia umieszcza się je w specjalnym termostacie utrzymującym stałą temperaturę 37 stopni.
Po zebraniu próbki męskiego nasienia umieszcza się ją w sterylnej kolbie. Temperatura przechowywania nasienia powinna być stała. Proces chłodzenia odbywa się w 2 etapach.
W pierwszym z nich ejakulat najpierw umieszcza się w komorze chłodniczej, w której stopniowo obniża się temperaturę. Z reguły jego wartość wynosi -35 stopni. Następnie przeprowadza się głębokie zamrażanie, zanurzając specjalną kolbę nasieniem w ciekły azot. W tym stanie trwałość plemników może sięgać kilku dekad.
Aby użyć ejaculate wcześniej poddanego krioprezerwacji, naczynie umieszcza się w ciepłej wodzie, gdzie następuje powolne rozmrażanie. Następnie zużyte krioprotektanty są usuwane przez powtarzające się ponowne wytrącanie plemników w wirówce. Następnie sam płyn nasienny zostaje zastąpiony przez pożywkę, w której następnie umieszcza się plemniki.